Prevail色谱柱的保存:
1. 几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗),再把Prevail色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
2. 如果Prevail色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
3. Prevail色谱柱应贮存在4℃室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。
4. 注意溶剂的PH值,一般硅胶基质的色谱柱控制在2~8范围内。
温馨提示:
①首先Prevail色谱柱必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。
②如果您使用的流动相中含有盐,请首先用高比例水冲洗(3%-5%有机相,1ml/min流速,冲洗30至40分钟),然后再用纯乙腈冲洗30分钟。
③一定要将Prevail色谱柱的两端封严,以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,引起柱子结构的几何学改变,这可导致柱效的严重降低。
Prevail色谱柱的清洗
用后对Prevail色谱柱的冲洗保存也比较重要,使用了缓冲系统的尤其要注意。这里推荐一个反相色谱系统的通用冲洗流程:将所有通道置换成含有较低有机相比例的水相中,比如10-30%乙腈或甲醇,然后冲洗1个小时,然后再梯度增加有机相比例,各冲洗一定时间,zui终保留在高有机相比例的冲洗液里。低有机相比例的冲洗液是为了尽可能地冲洗缓冲盐。通常低压梯度洗脱的液相色谱仪采用的是四元泵,就是单泵四通道,比例阀混合。
这种混合方式有个弊端,就是混合效果差,因为各通道不同比例是通过开关各通道阀的时间来控制的。打比方乙腈:缓冲盐=50:50,如果流速是1.0mL/min,并不是说乙腈和缓冲盐以各0.5mL/min的流速来混合;而是流速一直是1.0mL/min,但是在往复泵一个来回的时间内,两个通道分别打开一半的时间,也就是说系统管道里是一段乙腈、一段缓冲盐。这样就会造成盐的析出。
所以,往往是两通道混合,就算没有用缓冲盐,还是建议先按比例混合好了,然后走单通道,否则的话一样会造成盐析出,或者基线波动。走梯度洗脱的话,往往会把有机相通道(B)中加入一定比例的水,或者把水相通道(A)配成梯度洗脱的初始比例,把有机相通道(B)配成梯度洗脱zui终的比例。
以上是关于Prevail色谱柱的保存和清洗方法,更多详情咨询!
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